반응형 실험노트5 western blot Southern blot : DNA detectionNorthern blot : RNA detectionWestern blot : Protein detection Western blotWestern blot은 찾고자 하는 protein의 antigen epitope과 반응하는 antibody를 이용하여 단백질 혼합 물 중에서 원하는 단백질(antigen)만을 찾아내는 방법이다. 전기영동을 이용하여 단백질을 gel 상에서 크기에 따라 분리한 후, PVDF, nylon과 같은 membrane에 transfer한다. Membrane에 발광하는 probe가 붙어있는 antibody(항체)를 이용하여 찾고자 하는 특정 단백질을 검출한다. 여러가지 단백질 중에서 원하는 단백질만을 보는 방법으로 fluoresce.. 2019. 9. 5. Real Time RT-PCR 정확한 유전자 발현 분석의 핵심 Real-time PCR의 기본 개념Quantitative real time PCR(qRT-PCR)은 1992년에 도입되어 생명공학에 응용되기 시작 하였다.이 기술은 잘 알려져 있는 PCR 기법을 개량한 것이다. PCR은 핵산의 효소 증폭을 의미하고 있으며, 극히 적은양의 시료를 대량으로 증폭할 수 있다는 장점과 그 과정의 간단함 때문에 생명공학 대부분의 cloninig, sequencing 등의 기본 기술로 응용되었다. 그러나 분석도구로서의 PCR은 결정적인 한계를 가지고 있는데, 증폭된 산물의 정량화가 불가능하다는 점이었다.즉 , 기하 급수적으로 핵산을 복제하여 증폭하기 때문에 초기에 원래 존재하였던 핵산의 양을 추정하기가 어렵다.이한계는 1992년 증폭되는 핵산의 양을 정량적으로 핵산물질에 형광을 .. 2019. 7. 22. Flow cytometry -Key parameters measured are scatter and fluorescence What type of signals do we see with Flow ?Scatter – Forward Scatter (FSC) parallel or Perpendicular FSㅊ– Side scatter (SSC) Fluorescence– FITC , PE, APC, GFP, DAPI (plus lots lots more) Scatter parameters & how they are measuredUnderstanding Scatter Signals FSC has some similarities to sizeSSC has some similarities to granularity and complexity Fluorescent Signals: A cytometer can detec.. 2019. 6. 26. Flow Cytometry 3 core systems 3 core systems – fluidics, optics, electronicsFluidics - The Flow Cell (Delivery of sample to laser intercept)> A flow cell consists of a liquid stream which it wills carries and arrange the cells properly. > The arrangement processes are important so that the liquid stream can pass as a single file through the light for a purpose of sensing.> use the principle of hydrodynamic foc.. 2019. 6. 26. Introduction to FlowCytometry What Is Flow Cytometry ? Flow= the motion characteristics of fluids.Cyto=cellsmetry=measurement Cytometryis a general name for a group of biological methods used to measure various parameters of cells. Parameters which can be measured by cytometric methods are cell size, the stage of the cell cycle, the DNA content of the cell, the existence or absence of specific proteins on the cell surface or.. 2019. 6. 25. 이전 1 다음 반응형